MÉDIUM PEMBA

Vzhled na Bacillus cereus selektivním agaru (PEMBA).  

    Jedním z nejběžnějších selektivně diagnostických půd užívaných k izolaci a zjištění počtu B. cereus v potravinách je médium PEMBA. Splňuje požadavky média, které je dostatečně selektivní ke stanovení malého množství buněk a spor B. cereus v přítomnosti velkého počtu jiných potravinových kontaminantů. Médium je také dostatečně diagnostické, kolonie jsou snadno identifikovatelné a potvrditelné mikroskopickým vyšetřením.

Hlavními složkami média PEMBA jsou polymyxin, pyruvát, vaječný žloutek, mannitol a bromthymolová modř. Primárními diagnostickými znaky jsou vzhled kolonie, srážení hydrolyzovaného lecithinu a neschopnost B. cereus zkvašovat mannitol. Narostlé kolonie jsou typicky vroubkované, přibližně o průměru 5 mm a odlišují se svým zbarvením, které je turguově až pávově modré. Jsou obklopeny žloutkovou sraženinou téže barvy. Srážení zlepšuje pyruvát sodný a přídavek peptonu (~ 0,1%) zvýší sporulaci. Indikátorem pH, kterým určíme využití mannitolu, je bromthymolová modř. Polymyxin B (přidává se 100 iu) potlačuje růst doprovodných bakterií. Očekáváme-li v inokulu velké množství plísní, přídáváme cykloheximid (~ 40 μg/ml).

Tyto diagnostické znaky a vzhled kolonií odlišují B. cereus od jiných druhů rodu Bacillus, vyjma B. thuringiensis. Tento mikroorganismus lze rozpoznat od B. cereus postupem rychlého průkazného barvení.

Jiné mikroorganismy schopné růstu na médiu, které vykazují žloutkovou reakci, včetně Staphylococcus aureus, Serratia marcescens a Proteus vulgaris se odlišují od B. cereus formou a barvou kolonie. Tyto mikroorganismy se také vyznačují žloutkově-vyjasněnou reakcí na rozdíl od B. cereus, který vytváří žloutkovou sraženinu.