POSTUP RYCHLÉHO BARVENÍ  

Rychlé konfirmační barvení na agaru PEMBA.

      U B. cereus, jako jediného druhu z rodu Bacillus, se ve vegetativní buňce vyskytují globule lipidu, pokud tento mikroorganismus rostl na selektivním médiu. Tato vlastnost ho odlišuje i od B. thuringiensis, který se mu co se týče vzhledu a srážení lecithinu podobá. Kombinace existence celulárních lipidů s tvorbou pávově-modrých kolonií na médiu PEMBA je pro B. cereus diagnostická.

Tato mikroskopická zkouška na přítomnost lipidických globulí ve vegetativní buňce je doporučovaná jako rychlý a průkazný test a nahrazuje potřebu biochemického testování. Další výhodou této zkoušky je možnost stanovení a potvrzení těch kmenů B. cereus, které reagují s vaječným žloutkem slabě nebo vůbec.

Principem této metody je postupné barvení jeden den staré kolonie odebrané ze středu nárůstu, respektive dvoudenní kolonie z okraje nárůstu mikroorganismu na médiu PEMBA a vyhodnocení pod mikroskopem. Kolonie se nejprve obarví malachitovou zelení, která obarví spory světle až středně zeleně. Následuje barvení Sudanovou černí, která obarví lipidové granule černě. Posledním barvivem je safranin. Ten zbarví červeně zbytek buňky (cytoplazmu). Mikroskopické preparáty mohou obsahovat mnoho zeleně zbarvených spor mimo cytoplazmu.